新冠病毒检测 如何建立标准的PCR实验室？

 

新冠病毒检测中，核酸检测是目前最牢靠的筛查和确认手腕，利用也最为普遍。而核酸检测办法中，PCR仪无疑是本次疫情检测的关键利器。但核酸检测历程很简朴受净化，全部操纵需求在严厉的尝试情况中，才气包管数据功效的精确性，不漏检、错检疑似病例。

那末成绩来了，核酸检测中，该当如何建立一个尺度的PCR尝试室？PCR尝试室如何假想计划才可谓专业？PCR尝试室办理又有哪些留神要点？

尺度的PCR 尝试室分为四个地区，分别为：

n1.试剂配制区； 

n2.样品处理区； 

n3.核酸扩增区；

n4.产物分析区；

PCR尝试室假想计划 by湖北特尔诺尝试室

如利用全自动分析仪，地区可恰当兼并。

（进入各事情地区必须严厉按照单一标的目标停止，差别的事情地区利用差别的事情服，比方差别的色彩。事情人员分开各事情地区时，不得将事情服带出） 

PCR尝试室平面计划

【各区的服从分别为】

试剂筹办区：扩增试剂的配制、分装和保存。     

样品处理区：样品注销、分装；核酸提取、保存和加样。    

扩减产物分析区：扩减产物的测定、功效分析、注销及陈述。  

湖北特尔诺尝试室PCR尝试室工程案例

扩增前区与扩增后区应严厉分开，须利用差别的房间，两区之间最好有一定的距离。  

利用商品化试剂盒可在样品处理区停止大批试剂配制。     

在满意以下操纵和干净处理请求的条件下样品处理区和试剂筹办区可设在同一房间内：    

在生物宁静柜内操纵；     

每个尝试人员、尝试组分别利用各自的试剂及耗材；    

盛放净化质料的器皿密封并一次性利用；  

用有用的办法对操纵地区和共享用具在尝试前后停止干净及消毒。

PCR尝试室建立计划要点

1、主体构造： 

主体为彩钢板、铝合金型材。室内统统阴角、阳角均接纳铝合金50内圆角铝，从而处理简朴净化、积尘、不简朴打扫等成绩。构造坚固，线条简明，美妙风雅，密封性好。

2、尺度的三辨别隔和睦压调理：

将PCR历程分红试剂筹办、标本制备和PCR扩增检测三个独立的尝试区。全部地区有一个团体缓冲走廊。每个独立尝试区设置有缓冲区， 同时各区经过历程气压调理，使全部PCR尝试历程中试剂和标本免受气溶胶的净化并低落扩减产物对人员和情况的净化。

可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和 PCR 扩增区的排风扇往外排气，在尝试区的外墙上和各扇门上都装置有风量可调的回风口，氛围经过历程回风口向室内换气。

3、 消毒：

在三个尝试区和三个缓冲区顶部和传送窗内部装置有紫外灯，供消毒用。

在试剂筹办区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对尝试桌停止部门消毒。

4、机器连锁不锈钢通报窗：

试剂和标本经过历程机器连锁不锈钢（不建议利用电子连锁方法）通报窗通报，包管试剂和标本在通报历程中不受净化（人物分流） 

5、 空中

空中建议利用PVC卷材空中或自流坪空中，团体性好。便于停止打扫，耐腐化。没有条件的也可接纳水磨石空中，或大块的瓷砖（起码800mm×800mm）接缝需求小于2mm。

6、照明

灯具要选用净化灯具，能到达便于清洗、不积尘的特征。

在建立的历程中应留神

●尺度的装置流程和片面的效率流程。 

●严厉按照尺度科学假想的装置流程。

●装置前需求肯定以下装置条件，如：电源电压，电源进线地位，电话收集线进线地位，进水水压，最小装置空间，空中平坦度，通风孔、进水管和下水管的地位等，幻想形状的空间尺寸和通风口尺寸。

PCR尝试室假想要点

PCR尝试室能够是分离情势，也能够是组合情势。完成一组PCR尝试，凡是应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个尝试历程，若尝试工艺需求，还应增长样品破坏历程。

1、分离情势PCR尝试室

所谓分离情势PCR尝试室，是指完成上述尝试历程的尝试用房相相互距较远，呈分分安插情势。关于这类安插情势的PCR尝试室，因为各个尝试之间不简朴相互滋扰，因此无需特别条件请求。 

2、组合情势PCR尝试室

所谓组合情势PCR尝试室, 是指完成PCR四个尝试历程的尝试用房相邻安插，组成独立尝试地区的情势。关于组合情势PCR尝试室，因为各个尝试间集合安插，简朴组成相互滋扰，因此，对整体计划和屏蔽体系具有一定的请求。各室在入口处设缓冲间，以减少室内外氛围交流。

湖北特尔诺尝试室对PCR尝试室建立一些经历分享：

试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的氛围进入，组成净化；

能够经过历程把握进风风量大于排风风量到达正压结果。

核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶分散出去净化试剂与样品，能够经过历程把握排风风量大于进风风量到达负压结果。 

在幻想状况下，PCR尝试室缓冲间内，可设置正压，使室内氛围不流向室外，室外氛围不流向室内。 PCR尝试室进风由原有中心空调把握，请求将中心空调风口装置到指定定点，且高度为空中铺装好后2600mm处。

假如利用荧光PCR仪，扩增室和产物分析室能够兼并。

若房间进深许可，可设PCR内部公用走廊。需求指出的是在减少室内外氛围交流方面，缓冲间比公用走廊更故意义。

各个地区之间应具有单向的尝试工艺流、物流、人流与气流，组成单向流程的保护屏蔽，制止尝试之间的相互滋扰，避免核酸气溶胶对尝试历程组成净化发生假性功效。

尝试室的墙体，包罗顶棚，应构造坚固、气密性好；统统阴角宜接纳圆弧形线条过渡；墙体内壁光亮、不吸附、耐腐化、易清洗消毒；空中质料应满意无漏洞、无渗漏、光亮、耐腐化的请求。

PCR尝试室主要装备

试剂筹办区 

仪器装备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天安稳平静离心计心情等，加样器、天平除要公用外，还应有按期校准。   试剂分装应在超净台中停止  扩增反应混淆液应利用分子生物学级的，试剂制备好后应有质检：一能否有净化、二是检测试剂的扩增结果。

标本制备区 

仪器装备主要有生物宁静柜、加样器、离心计心情、温育仪、混匀器等  

扩增区 

扩增区的主要仪器是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心计心情、可移动紫外灯。扩增仪需停止校准。并配备UPS电源，以免因为电压的颠簸，停电对扩增结果的影响。

分析区 

本区所利用的仪器装备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等 洁净尝试区的缓冲间部门面积不能逾越主尝试室的八分之一,这是有划定的。 

一些噜苏的、不成疏忽的尝试室假想

1.尝试室空调通风体系假想及压力把握 

PCR尝试室并没有严厉的净化请求，但是为制止各个尝试地区间交叉净化的能够性，宜接纳全送全排的气流构造情势。同时，要严厉把握送、排风的比例以包管各尝试区的压力请求。

2.净化的防备与把握  

PCR尝试室假想的中心成绩是如何制止净化。在实践事情中，常见的有以下几种净化范例：扩减产物的净化；自然基因组DNA的净化；试剂的净化和标本间的净化。因为一旦发作净化，尝试就必须停止，直到找到净化源为止，而且尝试功效必须取消，需重新停止尝试。所以发作净化后再环绕尝试室来寻找净化源不但耗时而且烦琐，华侈人力物力。因此要制止净化，首先应是防备，而不是消弭。

PCR尝试室不成短少的严厉办理

（1）严厉把握收支尝试室的人员。与尝试无关的人员不得随便收支尝试室，有条件的状况下要设置独立的通道和收支全部尝试区的门； 

（2）只管减少在尝试区内不须要的走动以减少交叉净化的能够性。 

（3）扩减产物分析区是最主要的扩减产物净化前导发端，废液不能在尝试室中倾倒，必须经消毒液浸泡消毒后在阔别尝试室的地方弃掉，用过的吸甲等一次性质料也应经消毒液浸泡消毒后同一处理，如燃烧等； 

（4）扩减产物分析区能够会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别留神尝试人员的宁静防护。完整的尝试室配套装备是包管明验事情的须要条件，应按照各个尝试室尝试内容的差别配备响应的装备和仪器，如超净事情台、离心计心情、加样器等。

关于湖北特尔诺尝试室

湖北特尔诺尝试室承接各种尝试室团体建立，15年尝试室行业处理计划经历，做过上百个行业的尝试室建立：化学尝试室假想　物理尝试室假想　研发尝试室假想　PCR尝试室假想　微生物尝试室假想　医学尝试室假想BSL-2尝试室假想　医药尝试室假想　分子生物尝试室假想　食品检测尝试室假想　药品检验尝试室假想　细胞尝试室假想　植物房尝试室假想　石油化工尝试室假想　情况监测尝试室假想　公安体系尝试室假想　科研院校尝试室假想　疾控中心尝试室假想　检验检疫尝试室假想　农产物检验尝试室假想　收支境检验科尝试室假想　水质检验尝试室假想　绿色生态尝试室假想　工场尝试室假想　洁净尝试室假想　智能尝试室假想　可移动模块尝试室假想 

湖北特尔诺尝试室设有大范围当代化尝试室展厅，诚邀广大客户朋友前来实地考查。

镇静电话：袁司理：18672949069   

供稿：湖北特尔诺尝试室

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